Методика мазка по Папаниколау

Метод Папаниколау

Готовят накануне растворы красок.

1. Лихтгрюн — 0,1 г сухого вещества на 1 мл дистиллирован­ной воды.
2. Эозин желтоватый — 0,1 г сухого вещества на 1 мл дистил­лированной воды.
3. Бисмаркбраун — 0,1 г сухого вещества на 1 мл дистиллиро­ванной воды.

Водные растворы сохраняют в течение суток при 30—37° С. Из водных растворов приготовляют спиртовые растворы.

1. Лихтгрюн — 1 мл водного раствора на 200 мл 95° спирта.
2. Эозин желтоватый — 1 мл водного раствора на 200 мл 95° спирта.
3. Бисмаркбраун — 0,25 мл водного раствора на 50 мл 95° спирта.

Для приготовления смеси спиртовые растворы смешивают в следующих количествах.

1. Лихтгрюн — спиртовый раствор — 200 мл.
2. Эозин желтоватый — спиртовый раствор — 168 мл.
3. Бисмаркбраун — спиртовый раствор — 32 мл.

К смеси прибавляют фосфорномолибденовую кислоту в коли­честве 0,68 г сухого вещества и 4 капли насыщенного водного рас­твора углекислого лития.

Порядок окраски

1. Фиксатор — смесь Никифорова. Минимальное время фик­сации — 30 мин.
2. Вынув из фиксатора препарат, промывают 96° спиртом, за­тем дистиллированной водой.
3. Красят гематоксилином 2—3 мин., промывают в воде (пер­вый стакан).
4. Дифференцируют 0,5% раствором соляной кислоты до по­краснения в течение 2—3 мин.; сливают, промывают в воде (второй стакан). Контролируют под микроскопом окраску ядер.
5. Опускают на 1 мин. в слабый раствор углекислого лития (3 капли насыщенного водного раствора лития на 100 мл дистил­лированной воды). Промывают в воде (третий стакан).
6. Тщательно обезвоживают мазок 96° спиртом.
7. Красят оранжем Г 1 мин., наливая краску на стекло. Сли­вают и хорошо промывают спиртом до удаления избытка краски.
8. Красят лихтгрюном 2 мин., смывают спиртом, промакают.
9. Ксилол, бальзам. Покровное стекло (пленка).

Лучшее окрашивание выделений из различных органов обеспе­чивает метод Папаниколау, дающий возможность получить тонкое окрашивание клеточных элементов и уловить мельчайшие особенности в структуре протоплазмы и ядра. При этом особенно хорошо оттеняются базофилия и оксифилия протоплазмы, чего нельзя добиться при исследовании мазка в нативном препарате.

После фиксации препарат пересылают в лабораторию, где его окрашивают и изучают под микроскопом. Для цитологического исследования нативных препаратов по методу А. Я. Альтгаузена исследуют мазок, взятый с поверхности пораженной ткани. Вы­деления, собранные стерильным тампоном, наносят на стекло, а в тех случаях, когда на поверхности тампона имеются кусочки се­рого цвета и плотноватой консистенции, их снимают шпателем, кла­дут на предметное стекло и в таком виде исследуют под микроскопом.