Одним из недостатков существующей технологии производства холерной вакцины бивалентной таблетированной является затратный этап выделения нативных антигенов штамма Vibrio cholerae 569В Инаба.
Данный недостаток обусловлен тем, что выделение О-антигена и холерогена-анатоксина проводят методом солевого осаждения сульфатом аммония непосредственно из детоксицированного безмикробного центрифугата формалинизированной культуральной жидкости холерного вибриона, что приводит к его значительному расходу. Устранить указанный технологический недостаток может тангенциальная фильтрация http://vladisart.ru/products/layout/cross-flow-filtration.html путем предварительного концентрирования безмикробного формалинизированного центрифугата. Поэтому исследования, направленные на внедрение в производственный процесс технологий концентрирования антигенных компонентов холерной химической вакцины, получаемых из штамма V. cholerae 569В Инаба тангенциальной фильтрацией, имеют под собой определенную практическую основу и являются актуальными.
Выделение протективных антигенов из безмикробных центрифугатов, подвергнутых концентрированию, проводили с использованием ряда последовательно выполняющихся операций:
- осаждение балластных фракций сернокислым аммонием при 37 % насыщении, после формирования осадка при комнатной температуре материал центрифугировали на центрифуге Beckman в течение 20 мин;
- диализ полученного осадка против дистиллированной воды;
- стерилизация отдиализованного осадка путем фильтрации через мембраны с диаметром пор 0,2 мкм и лиофилизация.
Процесс ультрафильтрации возможно интенсифицировать путем проведения процедуры «сканирования» давления. Для повышения эффективности процесса концентрирования О-антигена и холерогена-анатоксина были проведены исследования по выбору рационального соотношения давления на входе и на выходе фильтрационной установки. Проведенные исследования показали, что оптимальными параметрами для концентрирования ХА и О-АГ являются давление на входе равное 2,5 и на выходе 0,5 кгс/см2 соответственно.
С повышением температуры скорость процесса фильтрации возрастает. В связи с этим для дальнейшей оптимизации процесса фильтрации, важное значение приобретали исследования по изучению температурных режимов концентрирования и их влияния на качество полупродуктов.
Таким образом, технология концентрирования ХА и О-АГ штамма Vibrio cholerae 569В Инаба из безмикробного центрифугата методом тангенциальной ультрафильтрации, позволяет снизить количество сульфата аммония, используемого для осаждения до 10 раз и получать препараты с показателями качества, отвечающими требованиям нормативной документации, является перспективным в производственном процессе получения холерной вакцины бивалентной химической таблетированной.