Грипп — серьезное заболевание дыхательных путей, вспышки которого отражаются не только на здоровье человека, домашнего скота, но и влияют на всю мировую экономику. Были выявлены различные вирусы гриппа А с различными комбинациями гемагглютинина (H1-H16) и нейраминидазы (N1 до N9). Например, в начале июня 2009г появился новый вирус гриппа H1N1, быстро распространившийся в 74 странах и принесший значительные потери. Вакцины эффективны только при хорошем согласовании со штаммом вируса гриппа, который будет циркулировать в течение следующего сезона. Кроме того, обилие вариантов гриппа привело к развитию устойчивости к антивирусным препаратам. Поэтому необходимы превентивные меры, способные предотвратить заражение вирусом гриппа, независимо от штамма.
Кислотный полисахарид Женьшеня обыкновенного (ПЖ) показал свое иммуномодулирующее действие, в зависимости от сроков лечения и состояния окружающей среды либо иммуностимулирующее либо иммуносупрессивное. Полисахарид женьшеня стимулирует производство цитотоксических клеток против опухолей и стимулирует производство макрофагами хелперов цитокинов 1 и 2 типа (Th1 и Th2). Ему также присущ эффект модуляция антиоксидантной защитной системы, таких ферментов, как супероксиддисмутаза и глутатион пероксидазы, возможно через активацию регуляторных цитокинов. Последние исследования показали, что при применении ПЖ на ранней стадии подавляется острая воспалительная реакция в результате повышения антимикробной активности. Тем не менее, профилактическая эффективность при вирусной инфекции до сих пор неизвестна.
МЕТОДЫ: Вирусы гриппа были выращены в 11-дневных куриных эмбрионах. Мыши инфицированы разными дозами вируса гриппа и, таким образом, была установлена 50% летальная доза (LD 50). Для приготовления концентрата полисахарида женьшеня была использована настойка женьшеня обыкновенного (с 85% этанола).
Сначала в экспериментах 8-10 недельным мышам под кратковременным наркозом вводили ПЖ интраназально или внутривенно в дозе от 12,5 до 50 мг/кг веса. Для определения эффективности ПЖ в лечении гриппа, от 6 до 10 в каждой группе мышей интраназально заражали патогенными штаммами A/PR8 или A/Philippines/82. Параллельно оценивалась эффективность вакцинации. Мышам внутримышечно вводили вакцину против гриппа, на следующий после вакцинации день и далее ежедневно в течение 12 дней интраназально вводили 0,1 мг ПЖ. На 13-й день после вакцинации мышей заражали летальной дозой вируса H3N2 (A/Philippines/82, 6 LD 50 ). Ежедневно регистрировались изменения веса и смертность. Изучали ткани легких мышей и определяли уровень цитокинов в экстракте легких.
РЕЗУЛЬТАТЫ и ВЫВОДЫ: Нативные мыши без лечения показали серьезную потерю массы тела более 25% и умерли или были умерщвлены на 8-й день после заражения A/PR/8/34. У мышей, которые получали ПЖ, было отмечено более медленное снижение массы тела, хотя они также потеряли примерно 20-25% массы тела. Важно отметить, что все получающие ПЖ мыши выжили после заражения их смертельной дозой вируса. При даче мышам ПЖ за 24 часа до заражения, только у 30% были отмечен защитный эффект.
В качестве альтернативного способа введения различных доз (10, 25 мг/кг), ПЖ вводили внутривенно за 6 часов до инфицирования мышей вирусом A/Philippines/82 (3 LD 50). Группа с низкими дозами в10 мг/кг показала 100% выживаемость, в то время как группа с высокими дозами 25 мг/кг показала частичную выживаемость — 66%. Тем не менее, в обеих группах оставшиеся живыми мыши имели серьезную потерю веса. Все нативные мыши в группе контроля погибли после заражения той же дозой A/Philippines/82 вирус (3 LD 50). Таким образом, ПЖ только частично эффективен при внутривенном введении высоких доз. Результаты показывают, что низкая доза ПЖ оптимальна и приводит к повышению защитных свойств организма даже при инфицировании смертельной дозой гриппа штамма H3N2.
Вскрытие показало, что в группе получающих ПЖ мышей, вирусов в ткани легких было в 2,5 раза меньше по сравнению с контрольной группой. Кроме того, при инфицировании смертельной дозой вируса уровни цитокинов IL-6 оказались ниже в группе, получавшей ПЖ по сравнению с контрольной. Эти результаты показывают, что ПЖ-опосредованная защита частично связана с ингибированием репликации вируса в тканях легких, и снижением активации воспалительных цитокинов, а также стимуляцией образования противовирусных цитокинов ИФН-?.
Иммунизация инактивированной вирусной вакциной обычно приводит к формированию хорошего иммунитета против гомологичной вирусной инфекции, но не против гетеротипного вируса гриппа. В этом исследовании определили последствия профилактического использования ПЖ на индукцию защитных свойств у мышей, вакцинированных против гриппа VLP, содержащей HA и М1, полученные из H1N1 A/PR8 вируса. Все нативные мыши потеряли более 75% веса тела и некоторые погибли. Кроме того, все привитые гетеротипной вакциной мыши также погибли, хотя их смерть была отсрочена во времени. Группа не привитых мышей, ежедневно получающие ПЖ в течение 12 дней, имели серьезную потерю массы тела, но в этой группе была отмечена 25% выживаемость.
Это исследование демонстрирует эффективность полисахарида женьшеня обыкновенного как в качестве средства терапии, так и для профилактики гриппа.