Серологические методы диагностики вирусных инфекций

Серологические методы при диагностике вирусных инфекций применяются широко. Важно знать, что при исследовании антител почти во всех случаях исследуют парные сыворотки: первый образец забирают немедленно, а второй — через 10-14 дней. Диагно­стическим считается нарастание титра антител не менее, чем в четыре раза. Исследование именно парных сывороток позволяет убедиться, что обнаруженные антитела не имеют от­ношение к перенесенной в прошлом инфекции, а именно к этому случаю.

В связи с этим определение антител зачастую имеет ретроспективный характер, по­скольку через две недели, которые занимает проведение исследования, его клиническое значение обычно минимальное (зачастую инфекция к этому времени уже разрешается). Однако при исследовании некоторых антител (ВИЧ, вирусы гепатитов) парные сыворотки применять необязательно.

К серологическим методам диагностики вирусов относятся следующие методы

Методы идентификации вируса:

• реакция нейтрализации (РН) — неизвест­ный вирус смешивают с известными антисы­воротками (по отдельности) и вносят в моно­слой клеток; при отрицательном результате (несовпадение сыворотки и вируса) клетки по­ражаются (А) и гибнут; при положительном результате (Б), то есть когда сыворотка подоб­рана верно, гибели клеток не наблюдается;
• реакцию интерференции используют для вирусов, которые не оказывают видимого ЦПД (не убивают и не изменяют пораженные клетки); сперва ее проводят так же, как РН, а в конце к новой культуре добавляют еще и известный вирус с выраженным ЦПД; если ЦПД не проявилось, это означает, что известный вирус не смог поразить клетки, так как они уже были поражены исследуемым (неизвестным вирусом), то есть наблюдается явле­ние интерференции; если же ЦПД в монослое проявилось, это означает, что известный вирус свободно поразил клетки, а исследуемый вирус был успешно нейтрализован анти­сывороткой, то есть примененная антисыворотка соответствует исследуемому вирусу;
• прямая РИФ;
• иммунная электронная микроскопия;
• реакция торможения гемагглютинации (РТГА) применяется для вирусов, обла­дающих гемагглютинирующей активностью (гриппа, кори, краснухи и др.); культуру воз­будителя смешивают с известной антисывороткой и эритроцитами; наличие гемагглюти­нации говорит о несоответствии сыворотки и возбудителя, а отсутствие (то есть тормо­жение) гемагглютинации — о соответствии; в варианте реакции с торможением гемад- сорбции (РТГАдс) эритроциты вносят в клеточную культуру и при несоответствии сыворотки наблюдают под малым увеличе­нием микроскопа прилипание (адсорбцию) эритроцитов на клетках;:

Выявление антигенов:

• диагностика вирусов с помощью ИФА;
• РОНГА (редко);

Выявление антител к вирусам в крови:

• ИФА;
• РТГА;
• реакция связывания комплемента (РСК);
• непрямая РИФ;
• радиоиммунный анализ (РИА).