Бактериологические исследования у животных проводятся с целью обнаружить синдром избыточного бактериального роста, наличие клостридий, сальмонеллеза, иерсиниоза, кампилобактера и других инфекций.
Энтеротоксины Clostridium
Патогенная роль Clostridium perfringens и Clostridium difficile еще не была до конца доказана. Оба этих микроорганизма можно обнаружить в фекалиях здоровых собак и кошек, диарею же вызывают особые энтеротоксины, выделяемые этими бактериями. Следовательно, диагностика и бактериологические исследования у животных нацелена на выявление в фекалиях энтеротоксинов. Энтеротоксин Clostridium perfringens высвобождается во время распада вегетативных клеток и может быть обнаружен с помощью латекс-агглютинации или иммунофер- ментного анализа (ИФА). Аналогично энтеротоксин С. difficile выявляется латекс-агглютинацией или твердофазным иммуноферментным анализом (ТИФА). Впрочем, наличие одного из энтеротоксинов в любой пробе фекалий не является причиной диареи у отдельного пациента. Анализы, основанные на ПЦР-тестах для выявления генов с кодом различных энтеротоксинов, уже были описаны; однако, эти тесты на сегодняшний день используются только на экспериментальной основе.
Синдром избыточного бактериального роста (SIBO) у животных
Культивирование пробы из двенадцатиперстной кишки.
Количественное бактериологическое культивирование пробы материала из двенадцатиперстной кишки считается «золотым стандартом» бактериологического исследования у животных на синдром чрезмерного бактериального роста в тонком отделе кишечника (SIBO). Секрет двенадцатиперстной кишки собирается во время эндоскопии посредством аспирации жидкости через стерильную трубку, введенную в рабочий канал эндоскопа, или путем непосредственной аспирации через иглу во время диагностической лапаротомии. Однако бывает затруднительно собрать достаточное количество секрета двенадцатиперстной кишки. Культивирование материала из двенадцатиперстной кишки следует выполнять немедленно после сбора пробы для сохранения облигатных анаэробных микроорганизмов. Количественный и качественный бактериологический анализ требует посева нескольких различных разведений на разных селективных средах, что делает этот метод непрактичным и чрезмерно дорогим для повседневного применения. Более того, есть сведения о широком разбросе показателей нормы при получении результатов культивирования материала из двенадцатиперстной кишки у собак и кошек, поэтому правильная оценка результата единственного клинического образца практически невозможна. Стандартная процедура сбора и количественного посева секрета двенадцатиперстной кишки еще не принята.
Определение неконъюгированных желчных кислот в сыворотке крови.
Желчные кислоты синтезируются и конъюгируются в печени. После выделения в тонкий отдел кишечника они способствуют эмульгации жиров. Небольшое количество внутри- просветных желчных кислот деконъюгируется бактериями, производящими гидролазу желчных солей. Эта деконъюгация усиливается при наличии синдрома чрезмерного бактериального роста в тонком отделе кишечника с теми анаэробными видами бактерий, которые содержат деконъюгирующую гидролазу. Неконъюгированные желчные кислоты быстро всасываются в кровь, в которой можно определить их количество. Предварительное исследование 9 из 10 собак с положительными результатами посева на синдром чрезмерного бактериального роста в тонком отделе кишечника показало увеличение сывороточной концентрации неконъюгированной холевой кислоты, основной желчной кислоты у собак. К сожалению, по неясным причинам концентрация неконъюгированной сывороточной желчной кислоты не позволяет выявить собак с диареей, чувствительной к антибиотикам. Это бактериологическое исследование у животных, возможно, более полезен для длительного повторного исследования отдельных пациентов, чем для диагностики синдрома чрезмерного бактериального роста в тонком отделе кишечника в клинической практике.
Оценка количества водорода в выдыхаемом воздухе.
Клетки млекопитающих не синтезируют водород, но он выделяется в процессе метаболизма бактерий. Описано несколько процедур для анализа выдыхаемого водорода у собак и кошек с целью бактериологические исследования у животных. Одна из процедур заключается в оральном введении раствора сахара с последующим определением выдыхаемого водорода каждые 15 минут в течение нескольких часов. У здоровых собак сахар тестового раствора переваривается и абсорбируется до того, как он достигнет бактериальной флоры толстого отдела кишечника, поэтому выделяется только небольшое количество водорода. Однако у собак с синдромом избыточного бактериального роста может иметь место чрезмерная углеводная ферментация из-за повышенного количества бактерий в тонком отделе кишечника. Водород, образовавшийся в результате этой ферментации, проникает в кровь, достигает альвеол и выводится с дыханием. Поскольку водород образуется в тонком отделе кишечника, у животных с SIBO максимальное повышение концентрации выдыхаемого водорода происходит раньше, чем у пациентов с малабсорбцией, у которых неабсорбированные углеводы, в конце концов, ферментируются бактериями в толстом отделе кишечника, вследствие этого происходит более позднее пиковое повышение концентрации выдыхаемого водорода. Стандартная процедура анализа выдыхаемого водорода, увы, не нашла широкого применения, и ее ценность в диагностике SIBO все еще не выяснена.
Культивирование фекалий для бактериологических исследований
Неспецифическое культивирование фекалий как методи бактериологического исследования у животных практически бесполезно для диагностики желудочно-кишечных нарушений; однако, в некоторых случаях необходимо провести культивирование фекалий для выявления специфичных патогенов. Можно сделать посев свежего фекального материала для выявления Salmonella spp., Campylobacter spp., Yersinia spp. Несмотря на то что каждый из этих микроорганизмов может стать причиной хронической диареи у собак и кошек, они гораздо чаще диагностируются у помещенных в стационар животных со сниженным иммунитетом. У этих животных обычно отмечаются острые приступы кровавой диареи, часто сопровождаемые системными нарушениями. Тем не менее культивирование фекалий на эти энтеропатогены во многих случаях дает низкие результаты.
Статью подготовил и отредактировал: врач-хирург Пигович И.Б.