Вирусы могут культивироваться в культурах клеток, куриных эмбрионах и лаборатор­ных животных. Эти методы являются длительными, трудоемкими и затратными, но в то же время считаются «золотым стандартом» диагностики.

Культуры клеток, используемые для культивирования вирусов, разделяют на:

Первичные:

  • получают из ткани путем механического измельчения и обработки протеолитическими ферментами;
  • наиболее распространены культуры клеток почек обезьян, почек эмбриона челове­ка, амниона человека;
  • срок жизни органичен (2-3 недели);

Полуперевиваемые:

  • срок жизни увеличен, способы выдерживать 50-100 пассажей;
  • наиболее распространены культуры фибробластов эмбриона человека;

Перевиваемые:

  • обладают потенциальным бессмертием;
  • большинство происходят из опухолевых клеток;
  • наиболее распространены культуры HeLa (карцинома шейки матки), Hep-2 (карци­нома гортани), RH (почка человека).

Для культивирования клеток необходимы питательные среды, которые по своему на­значению делятся на ростовые и поддерживающие. Ростовые среды обеспечивают актив­ное размножение клеток для формирования монослоя, а поддерживающие — переживание клеток в уже сформированном монослое при размножении в клетке вирусов.

Для заражения используют культуры в пробирках с хорошо развитым монослоем кле­ток. Перед заражением клеток питательную среду удаляют и в каждую пробирку вносят взвесь материала, предварительно обработанного антибиотиками для уничтожения бак­терий и грибов.

После 30-60 мин. контакта вируса с клетками удаляют избыток материала, вносят в пробирку поддерживающую среду и оставляют в термостате до выявления признаков раз­множения вируса.

от admin

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *