Индикация и идентификация вирусов

В статье описана индикация и идентификация вирусов в культуре, ЦПД, вирусные включения.

Индикация вирусов — это процесс установления наличия их в культуре без уточнения видовой принадлежности.

Для индикации используются следующие методы:

Определение цитопатического действия (ЦПД), то есть характерного нарушения морфологии клеток, обнаруживаемого при микроскопии культур:

• гигантские многоядерные клетки — симпласты (парамиксовирусы);
• скопления набухших круглых клеток (аденовирусы);
• крупнозернистая дегенерация (герпесвирусы);
• дегенерация клеток с вакуолизацией (ретровирусы, флавивирусы);
• отсутствие ЦПД (также может быть диагностическим признаком);

Определение бляшкообразования:

• бляшки — это участки монослоя, на которых клетки разрушены вирусом;
• выглядят как зоны просветления;
• могут подсчитываться для определения цитопатогенности вируса в бляшкообра­зующих единицах (БОЕ).
• положительная реакция гемадсорбции;
• положительная реакция интерференции (при отсутствии ЦПД);

Цветная реакция:

• в среду вносят индикатор pH, который при нормальной жизнедеятельности клеток изменяет окраску из-за накопления в среде различных метаболитов;
• при заражении вирусом клеточный метаболизм резко снижается и окраска индика­тора не изменяется;

Образование в клетках вирусных включений:

• представляют собой вирусные «фабрики» или скопления вирусных частиц;
• цитоплазматические: тельца Негри (бешенство), тельца Гварниера и Пашена (на­туральная оспа);
• внутриядерные: тельца Каудри (простой герпес и ветряная оспа), Липшютца (вет­ряная оспа), «совиные глаза» (цитомегаловирусная инфекция).

Идентификация вирусов — это процесс надежного установления их видовой принад­лежности. Она проводится при помощи серологических методов (РТГА, РТГАдс, РН, РСК, РНГА, ИФА, РИФ, РИА) и молекулярно-генетических методов (ПЦР, молекуляр­ная гибридизация).